本研究采用經(jīng)典的遺傳毒理學(xué)試驗(yàn)方法：小鼠骨髓微核率試驗(yàn)、小鼠精子畸形分析試驗(yàn)，鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)、倉(cāng)鼠肺成纖維細(xì)胞(CHL)染色體畸變?cè)囼?yàn)， 以曬青毛茶為對(duì)照，對(duì)不同貯藏年份的共5種代表性普洱茶產(chǎn)品進(jìn)行了遺傳毒性安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)，以檢測(cè)其是否具有潛在的致突變和致癌毒性。?

材料與方法

1.1 茶葉原料?

為了研究普洱茶代表性產(chǎn)品的安全性，本研究選取了不同廠家，不同貯藏年份和不同包裝形式的五個(gè)普洱茶樣品作為研究對(duì)象，分別編號(hào)為：A、B、C、E、F，并選取了大葉種烘青綠茶作為對(duì)照。（如表）?

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1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

體重為18－22克昆明種(KM)小白鼠。?

1.3 實(shí)驗(yàn)菌株

鼠沙門(mén)氏傷寒桿菌突變株 TA97、TA98、 TA100 、TA102。?

1.4 試驗(yàn)細(xì)胞株

中國(guó)倉(cāng)鼠肺纖維細(xì)胞(CHL)株V79。?

試驗(yàn)方法?

茶樣常規(guī)成分分析方法

茶葉水浸出物：全量法；茶多酚總量測(cè)定：酒石酸鐵比色法；咖啡堿含量：紫外分光光度法；茶葉水分含量的測(cè)定：恒重法。?

除此之外，還用了小白鼠急性毒性試驗(yàn)方法、小白鼠骨髓微核試驗(yàn)方法、小白鼠精子畸形試驗(yàn)方法、Ames 試驗(yàn)方法、倉(cāng)鼠肺成纖維細(xì)胞(CHL)染色體畸變?cè)囼?yàn)。?? ?

結(jié)果與分析?

茶樣常規(guī)成分分析結(jié)果(如表)?

化學(xué)分析法是食品毒理學(xué)評(píng)價(jià)的重要手段，普洱茶生化成分的分析研究已有較多的報(bào)道，本試驗(yàn)選檢以上幾個(gè)項(xiàng)目，以對(duì)所試茶樣的情況作簡(jiǎn)要界定。檢測(cè)結(jié)果表明所選茶樣的常規(guī)成分具有較好的代表性。?

各茶樣小白鼠(KM)急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

各茶樣的半致死劑量(LD50)的計(jì)算, 急性毒性試驗(yàn)中LD50的計(jì)算有多種方法，本試驗(yàn)采用Bliss法統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各茶樣的急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其結(jié)果如下：

六個(gè)茶樣的急性毒性統(tǒng)計(jì)結(jié)果分析(如表)

急性毒性試驗(yàn)是指動(dòng)物一日內(nèi)單次或多次(在24小時(shí)內(nèi)分2～3次給藥)給藥后，在7天或14天中，連續(xù)觀察動(dòng)物所產(chǎn)生的毒性反應(yīng)及死亡情況，從定性和定量?jī)煞矫孢M(jìn)行觀察毒性反應(yīng)的方法。從毒理學(xué)角度來(lái)看，任何物質(zhì)都有毒性，人或動(dòng)物攝入任何物質(zhì)達(dá)到一定劑量都可能致死。文獻(xiàn)報(bào)道[171]，大鼠口服蒸餾水LD50為469±51 mL Kg-1，從表6可以看出，五個(gè)普洱茶樣品的LD50分別為：9.7g/kg、11.2g/kg、12.2g/kg、11.8g/kg、12.4g/kg，烘青綠茶樣的LD50為7.5g/kg，表明普洱茶樣的急性毒性比烘青綠茶樣還低，并發(fā)現(xiàn)六個(gè)樣品的一次灌胃量在5g/kg體重以下時(shí)喂養(yǎng)觀察十四天沒(méi)有動(dòng)物死亡，低于1/2LD50的灌胃劑量灌胃后多數(shù)動(dòng)物表現(xiàn)出神經(jīng)興奮癥狀；隨著灌胃劑量加大，動(dòng)物在十分鐘后出現(xiàn)神經(jīng)抑制癥狀。五個(gè)普洱茶樣的急性致死時(shí)間只有一個(gè)高峰期，而烘青綠茶則有兩個(gè)死亡高峰期，分析認(rèn)為普洱茶引起動(dòng)物死亡以及由烘青綠茶引起的第一死亡高峰是由過(guò)高濃度的咖啡堿所致，而烘青綠茶樣D引起第二個(gè)動(dòng)物死亡高峰則可能與過(guò)高濃度的茶多酚有關(guān)；根據(jù)WHO1977年頒布的毒性標(biāo)準(zhǔn)，六個(gè)茶樣的 LD50均大于5000 mg/kg體重，可判定為實(shí)際無(wú)毒。